Mueller Hinton II Agar
Terreno per il test di sensibilità agli antimicrobici mediante la tecnica di diffusione in agar secondo CLSI ed EUCAST.

Mueller Hinton II Agar è un terreno raccomandato per il test di sensibilità agli antimicrobici dei comuni microorganismi aerobi a crescita rapida, mediante la tecnica di diffusione su dischetto (metodo Kirby-Bauer), come standardizzato dal
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) e dal European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST).

Composizione del terreno

Il terreno Mueller Hinton Agar standard è così composto:

• Estratto di carne 2.0 g/L
• Digerito acido di caseina 17.5 g/L
• Amido 1.5 g/L
• Agar 17.0 g/L

Il terreno viene venduto in forma polverosa, con una granulometria fine, omogenea e di colore beige. In soluzione e in piastra, il terreno assume un colore limpido e leggermente opalescente, di colore giallo paglierino.

Il pH finale del terreno è pari a 7.3, a 20-25°C.

Preparazione del terreno

Per la preparazione di piastre Petri con il Mueller Hinton Agar, si procede sospendendo 38g di polvere (con la composizione sopra riportata) in acqua purificata fredda. Si porta ad ebollizione sotto agitazione e ai autoclava a 121°C per 15 minuti.

Una volta raffreddato a 47-55°C si procede con il trasferimento nelle piastre Petri, versando 25 ml per piastra. Prima di utilizzare le piastre, è necessario che la superficie sia asciutta, ma non in maniera eccessiva.

Procedura per il test di sensibilità

In sintesi, il test prevede la disposizione di dischi imbibiti di antibiotico sulla superficie di una piastra inoculata con l’isolato clinico. La formazione di un alone intorno ad uno o più dischi è indice della sensibilità dell’isolato a quell’antibiotico. Il diametro dell’alone formatosi intorno al disco viene misurato e confrontato con dei valori standard per determinare la sensibilità del microrganismo